期刊简介
《中华泌尿外科杂志》创刊于1980年，是中国科协主管、中华医学会主办的泌尿外科高级学术期刊。国内外公开发行。办刊宗旨是：报道国内外泌尿外科专业领 域的最新科研成果和临床诊疗经验及与临床密切相关的基础理论研究成果。本刊设有专家论坛、述评、临床研究、基础研究、论著摘要、经验交流、疑难病例析评、 创新与争鸣、病例报告、讲座、综述、专家笔谈等栏目。本刊是多个权威数据库收录的统计源期刊，并被美国化学文摘（CA）收录。影响因子及被引频次等重要统 计指标均居外科类期刊前列。曾被科协评为精品期刊、被中华医学会评为优秀期刊。
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首页>中华泌尿外科杂志
- 杂志名称：中华泌尿外科杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1000-6702
- 国内刊号：11-2330/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：国家期刊提名奖期刊收录：上海图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CA 化学文摘(美), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏, 万方收录(中), 维普收录(中), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
双特异性抗肿瘤重组腺病毒对前列腺癌细胞的抑制作用
王金辉；张慕淳；李霄；齐延新；刘广臣；孙丹丹；金宁一
关键词：前列腺癌, 凋亡素, 重组腺病毒, 凋亡
摘要：目的 探讨结合肿瘤特异性启动子hTERTp和特异性抑癌基因Apoptin的腺病毒AdhTERTp-E1 a-A poptin (Ad-VT)对前列腺癌PC-3细胞的抑制作用. 方法 于96孔板内制备前列腺癌PC-3单层细胞(5×103个/孔),分别用100个感染复数(multiplicity of infection,M OI)、10 MOI和1 M0I的重组腺病毒Ad-VT、Ad-CMV-Apoptin(Ad-VP3)、Ad-hTERTp-El a-EGFP (Ad-GT)和Ad-CMV-EGFP(Ad-EGFP)进行感染,以未感染孔为对照,每个剂量设3个复孔.采用96 h噻唑盐(MTT)法,检测重组腺病毒对PC-3细胞的抑制作用.于6孔板制备PC-3单层细胞(1 × 106个/孔),分别用100 MOI的Ad-VT、Ad-VP3、Ad-GT和Ad-EGFP感染PC-3细胞,培养48 h后,分别应用AO/EB染色法、DAPI染色法、Annexin V检测法对PC-3细胞进行染色,在显微镜下观察细胞形态,分析Ad-VT对PC-3细胞的抑制方式；应用Caspase检测法对PC-3细胞提取总蛋白,检测Caspase酶活性,分析Ad-VT对PC-3细胞的抑制方式. 结果 MTT法结果显示除Ad-EGFP外,Ad-VT、Ad-VP3和Ad-GT均 不同程度地表现出对PC-3细胞的抑制作用,其中Ad-VT、Ad-GT的抑制作用强于Ad-VP3,差异有统计学意义(P＜0.05)；培养48、72、96 h,随着MOI的增高,Ad-VT对PC-3细胞的抑制作用具有一定剂量效应关系趋势,感染剂量为100 MOI时,Ad-VT对PC-3细胞的抑制作用具有一定时间效应关系趋势.通过AO/EB、DAPI、Annexin V检测法和Caspase酶活性检测结果显示,Ad-VT可通过诱导PC-3细胞的凋亡抑制PC-3细胞的增殖.其中AO/EB染色可观测到经Ad-VT感染的PC-3细胞呈现橘红色；DAPI染色可观测到经Ad-VT感染的PC-3细胞细胞核呈现亮蓝色,且存在核内物质碎裂；Annexin V检测法可观测到经Ad-VT感染的PC-3细胞出现磷脂膜外翻、细胞核皱缩、细胞膜通透性增加等凋亡特征；Caspase检测结果显示Ad-VT可明显上调Caspase2、3、6、8、9酶的活性. 结论 结合肿瘤特异性启动子hTERTp和特异性抑癌基因Apoptin的腺病毒Ad-VT通过细胞凋亡能有效地抑制前列腺癌PC-3细胞的生长.
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