期刊简介
《中华泌尿外科杂志》创刊于1980年，是中国科协主管、中华医学会主办的泌尿外科高级学术期刊。国内外公开发行。办刊宗旨是：报道国内外泌尿外科专业领 域的最新科研成果和临床诊疗经验及与临床密切相关的基础理论研究成果。本刊设有专家论坛、述评、临床研究、基础研究、论著摘要、经验交流、疑难病例析评、 创新与争鸣、病例报告、讲座、综述、专家笔谈等栏目。本刊是多个权威数据库收录的统计源期刊，并被美国化学文摘（CA）收录。影响因子及被引频次等重要统 计指标均居外科类期刊前列。曾被科协评为精品期刊、被中华医学会评为优秀期刊。
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首页>中华泌尿外科杂志
- 杂志名称：中华泌尿外科杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1000-6702
- 国内刊号：11-2330/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：国家期刊提名奖期刊收录：上海图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CA 化学文摘(美), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏, 万方收录(中), 维普收录(中), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
高浓度草酸作用下HK-2细胞系中外泌体的提取与鉴定
何子奇；关晓峰；刘权；刘云龙；邓耀良
关键词：外泌体, 肾结石, 草酸
摘要：目的 探讨高浓度草酸作用下HK-2细胞系中外泌体提取与鉴定的方法.方法 2016年6月至2017年1月进行实验.配制含草酸浓度分别为0、0.25、0.50、1.00、2.00、4.00、5.00、8.00、10.00mmoL/L的DMEM/F12无血清培养基,分别对HK-2细胞干预48 h,然后用CCK-8法检测不同浓度草酸对HK-2细胞生存率的影响.结合倒置显微镜下观察细胞的形态学变化,选择2.00 mmol/L的草酸作为实验浓度.用2.00 mmol/L草酸对HK-2细胞系干预48 h,收集干预后的HK-2细胞系的上清液,采用超速离心法提取外泌体;透射电镜观察外泌体的形态、大小;Nanosight系统检测外泌体的粒径与分布;蛋白质印迹法检测外泌体特异性蛋白HSP70、CD63的表达.结果 CCK-8法检测结果显示0、0.25、0.50、1.00、2.00、4.00、5.00、8.00、10.00 mmol/L组细胞的生存率分别为(100.0±4.0)％、(97.7±1.5)％、(97.3±2.1)％、(87.7±2.1)％、(76.0±1.0)％、(58.1±2.6)％、(52.7±1.5)％、(37.7±3.2)％、(31.3±2.0)％.透射电镜下外泌体呈杯口状,包膜为典型的双层膜结构.Nanosight系统显示2.00mmoL/L组外泌体峰值粒径为56 nm,整体平均粒径为87 nm,粒径为30～150 nm的比例为91.2％.蛋白质印迹法检测结果显示外泌体中明显表达HSP70和CD63蛋白,提取外泌体后的HK-2细胞表达HSP70蛋白,不表达CD63蛋白.结论 2.00 mmol/L草酸作用HK-2细胞48 h后,可以通过超速离心法提取丰富的、较高纯度的外泌体,这将为后续深入研究高浓度草酸背景下外泌体的信号转导奠定基础.
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